二甲磺基乙烷处理生精小管体外培养模型的建立

【摘要】：目的建立二甲磺基乙烷(EDS)处理生精小管的体外培养模型。方法雄性SD大鼠于实验前7 d腹腔注射EDS,分离生精小管进行体外培养,分为基础处理组(加入胰岛素-转铁蛋白-亚硒酸钠培养基添加剂ITS,即ITS组)和促黄体素(LH)处理组(加入ITS和LH,即ITS+LH组),采用Ed U标记技术检测睾丸间质干细胞增殖情况,放射免疫分析技术及3β-HSD染色检测睾酮分泌及睾丸间质干细胞的分化情况。取雄性成年小鼠睾丸并分离生精小管,分别以不同浓度的EDS处理,其后再进行分组(ITS组和ITS+LH组)处理连续培养,采用放射免疫法检测培养基上清液中睾酮的分泌情况。结果与ITS组比较,大鼠生精小管ITS+LH组睾丸间质干细胞增殖较为明显。睾酮的分泌呈现与体内睾丸间质细胞发育分化趋势一致;且该模型在LH作用下,睾酮产生量大,持续时间长,表明该模型对LH敏感。1.72 mmol/L EDS可有效杀死小鼠生精小管上的成熟睾丸间质细胞;该处理模型在经过培养后又有睾酮的产生,且ITS+LH组生精小管培养上清液中睾酮含量显著高于ITS组(P0.01),表明EDS可以杀死成熟睾丸间质细胞,同样该模型也表现出对LH敏感。结论雄性大鼠和小鼠生精小管体外培养模型中,睾丸间质干细胞的发育分化过程与体内睾丸间质干细胞的发育分化相似,该模型是一个研究睾丸间质细胞发育分化的合适模型。 【作者单位】： 广东省生物制品与药物研究所;暨南大学医药生物技术研究开发中心;暨南大学细胞生物学系;
【关键词】： 生精小管 睾丸间质细胞 二甲磺基乙烷 促黄体素
【基金】：国家自然科学基金(81070477,31000663,31271607) 中央高校基本科研业务费专项资金(21611378) 广东省高等学校珠江学者岗位计划资助项目(2012)~~
【分类号】：Q492.4
【正文快照】： 睾丸间质细胞(Leydig cell)是由德国科学家Franz Leydig于1850年发现并命名的,是哺乳动物睾丸间质中的一种内分泌细胞,具有合成和分泌睾酮的功能,是男性体内雄激素的最主要来源[1],LC的发育、数量及雄激素合成功能对男性的各个方面都具有决定性的影响。睾丸间质细胞在其分化发

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