烟草秸秆生物有机肥携带病毒的血清学检测

【摘要】：烟草秸秆是一种营养丰富的有机肥资源,在农田的土壤改良、增产增收等方面都有较好利用效果。在烟草种植业,烟叶收获后,其秸秆通常遗弃田间或烧毁,这种传统的处理方式,一是造成有效资源浪费；二是导致环境污染。为此,湖北省烟草公司为合理利用我省烟草秸秆资源,在恩施州建立了烟草秸秆生物有机肥生产厂,从而进一步提高了烟草生产的附加值。由于烟草秸秆自然条件下残存有病原物,且具有潜在致病性。在有机肥生产过程中,秸秆的病原物是否致死,直接关系到成品肥应用的安全性。 本文对烟草秸秆生物有机肥生产的不同发酵工序、不同发酵时间等成品肥,进行病毒检测和盆栽传毒试验,旨在为烟草秸秆生物有机肥生产应用的安全性提供依据。主要研究如下： 1、烟草秸秆原材料病毒检测：通过对不同批次的烟草秸秆系材料进行病毒检测,结果表明原材料中存在TMV、CMV、PVX、PVY4种病毒。 2、不同消毒方式病毒检测：利用4种病毒抗血清对不同消毒方式的烟草秸秆有机肥产品进行检测,结果表明烤房消毒的产品对4种病毒抗血清呈阴性反应,滚筒消毒的产品对4种病毒抗血清呈阳性反应,经过紫外消毒的产品对4种病毒抗血清呈阳性反应。 3、不同消毒时间病毒检测：经过紫外消毒不同时间的产品仍然都对4种病毒抗血清呈现阳性反应,经过100℃以下的不同温度不同时间消毒的产品对4种病毒抗血清呈现阳性反应,经过100℃以上的高温消毒一定时间的产品对4种病毒抗血清呈现阴性反应。表明采用100℃以上的高温消毒方式可杀灭病毒或抑制病毒活性。 4、成品肥盆栽传毒试验：有机肥与复合肥盆栽烟草生长正常,外观无典型病毒病症状表现,未检测出烟草花叶病毒；其他盆栽处理表现出烟草花叶病毒表现出花叶、明脉等症状,可检测出TMV和CMV病毒。 根据对烟草秸秆生物有机肥原料、不同消毒方式和时间的中间产品、成品肥病毒检测及盆栽传病试验结果,研究认为,恩施州烟草公司生产的烟草秸秆生物有机肥在生产上应用是安全的。 【关键词】：烟草秸秆 生物有机肥 烟草病毒 酶联免疫检测 盆栽试验
【学位授予单位】：华中农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：S141
【目录】：

• 目录4-6
• 摘要6-7
• ABSTRACT7-9
• 1. 文献综述9-16
• 1.1 我国农业生产面临的肥效问题9
• 1.2 烟草秸秆生物有机肥应用现状9-10
• 1.3 烟草病毒病的发生与危害10-11
• 1.4 烟草秸秆有机肥生产11-12
• 1.5 烟草病毒病的检测方法12-15
• 1.5.1 指示植物法13
• 1.5.2 血清学检测13-14
• 1.5.3 电子显微技术14-15
• 1.5.4 分子生物学检测15
• 1.6 研究目的和意义15-16
• 2. 材料与方法16-22
• 2.1 材料16-19
• 2.1.1 烟草秸秆原材料及生物有机肥样品16
• 2.1.2 烟草秸秆原料和成品肥紫外线及高温消毒16-18
• 2.1.3 酶联免疫检测材料18
• 2.1.3.1 抗血清18
• 2.1.3.2 缓冲液18
• 2.1.4 烟草盆栽试验材料18-19
• 2.1.4.1 供试烟草秸秆有机肥材料18-19
• 2.1.4.2 供试烟草品种19
• 2.2 方法19-22
• 2.2.1 烟草秸秆生物有机肥携带病毒检测方法19-20
• 2.2.1.1 病毒检测样品制备19
• 2.2.1.2 间接酶联免疫检测法(ID-ELISA)19-20
• 2.2.1.3 双抗体夹心免疫检测法(DAS-ELISA)20
• 2.2.2 烟草秸秆生物有机肥盆栽传毒试验20-22
• 2.2.2.1 试验设计20-21
• 2.2.2.2 盆栽试验方法21
• 2.2.2.3 不同处理盆栽烟草发病植株酶联免疫病毒检测21-22
• 3. 结果分析22-28
• 3.1 烟草秸秆生物有机肥携带病毒检测结果22-25
• 3.1.1 烟草秸秆生物有机肥中间阶段产品检测结果22-23
• 3.1.2 烟草秸秆原料和成品肥不同消毒方式病毒检测结果23-25
• 3.2 盆栽烟草传毒试验结果25-28
• 3.2.1 盆栽烟草植株发病情况25-27
• 3.2.2 盆栽烟草酶联免疫检测结果27-28
• 4. 小结与讨论28-30
• 4.1 烟草秸秆有机肥携带病毒检测分析28-29
• 4.2 盆栽烟草传毒试验分析29-30
• 参考文献30-38
• 致谢38

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