如何提取马芷苋的有效成分的方法

【专家解说】：1 器材与方法 1.1 仪器与试剂 LAMBDA 35 型紫外分光光度计，Heraeus 烘箱，Philips Comfort粉碎机，SORVALL Evolution RC型离心机，磁力搅拌器(SI VORTEX)，通风橱，安捷伦6820型气相色谱、旋转蒸发仪(RE-52AA)。 石油醚，氢氧化钾，无水乙醇，尿素，10%硫酸，氨水，无水乙醇，氯仿均为国产分析纯。 1.2 材料马齿苋采自江西南昌一带，将其于烘箱中在60℃烘干至恒重，粉碎，密封备用。 1.3 步骤 1.3.1 马齿苋多糖的提取葡萄糖标准曲线的制作:蒽酮硫酸法测定糖含量，标准曲线方程:Y=0.584 3X+0.010 3(R2=0.997 1)。 马齿苋多糖的提取和测定〔8〕:准确称取马齿苋粉末100 g，按照1:30(W:V)加入蒸馏水，水煎煮3次(1.5，1.0，0.5 h)，过滤，合并3次提取液，浓缩提取液，冷却后4 000 r/min离心15 min，取上清，以无水乙醇调制终浓度为75%，4℃静置过夜，沉淀物再分别以无水乙醇、丙酮、乙醚回流洗涤，得灰白色粗多糖粉末，以适量蒸馏水溶解粉末，置4℃冰箱备用。 1.3.2 马齿苋多不饱和脂肪酸的提取亚麻酸甲酯标准曲线的制作:利用安捷伦6820型气相色谱制作标准曲线，采取标准品内标法。气相色谱条件:前进样口温度220℃，前检测器温度300℃，后检测器温度275℃，柱温150℃保持时间1 min，以15℃/min升温至200℃，以2℃/min升温至250℃，保持5 min。载气(N2)20ml/min，辅助气(H2)30 ml/min，空气(助燃气)350 ml/min，进样量1μl。标准曲线方程:Y=2 196.9X+1 305.4(R2=0.981 6)。 马齿苋不饱和脂肪酸的提取和测定〔9，10〕:称取马齿苋干粉100 g，按1∶4的体积比例加入400 ml石油醚，室温搅拌2 h，4 000 r/min，4℃离心15 min，取上清液，挥发尽石油醚，得黏稠状褐色油状物，称重，称取1/4倍于油状物的KOH，以3∶80(W/V)的比例溶于无水乙醇中。加至油状物中，搅拌，皂化反应45 min。再在4℃反应60 min。过滤，得透明溶液，浓缩回收乙醇，使乙醇含量不大于50%。加入等体积的蒸馏水，用浓盐酸调至出现分层(pH 2.0左右)为止，取上层油相。70℃水浴制备含有一定比例(20%)尿素的乙醇溶液。按2.4倍滤液体积的比例加入油相中，70℃水浴搅拌使溶液呈均匀的透明相。置4℃冰箱放置6h，过滤或离心除去包合物，浓缩回收乙醇。加入4倍于油状物的蒸馏水稀释，用1/3倍体积的氯仿萃取3次，挥发氯仿，得浓缩的多不饱和脂肪酸。 1.3.3 马齿苋生物碱的提取〔11〕称取100 g马齿苋粉末，加500 ml无水乙醇，40℃搅拌1 h。过滤，收集滤液，滤渣中加300 ml的无水乙醇，40℃搅拌1.5 h。过滤，收集滤液，滤渣中加300 ml的无水乙醇，40℃搅拌30 min。过滤，收集滤液，合并以上3次滤液。置旋转蒸发仪中挥发尽乙醇，出现黑色浸膏。在浸膏中加50 ml 10%的硫酸溶解，过滤。用氨水调pH至10.0，加入10ml 饱和NaCl(36 g NaCl / 100 g)水溶液。用1/5倍体积于原溶液的氯仿萃取5次，置通风厨中将氯仿挥发尽，10%乙醇溶解。