沼气池微生物生态群落PCR-DGGE分析方法研究

【摘要】：研究了适合于PCR-DGGE分析的沼气池污泥样品微生物基因组DNA快速提取方法,探讨了PCR反应条件、电泳时间与上样量对DGGE指纹图谱多样性的影响。试验结果表明,采用本研究所建立的SDS和Guanidine thio-cyanate-N-LS方法提取沼渣微生物总DNA,利用细菌特异性16S rDNA通用引物,经复原条件PCR(循环25次)扩增,所得PCR产物在85V电压下,上样量600ng,电泳时间为16 h时DGGE分离效果最佳,获得清晰的16S rDNA V3区片段的图谱。 【作者单位】： 南京师范大学生命科学学院;江苏省农业科学院农业资源与环境研究所;
【关键词】： 沼气池 微生物群落 DCR-DGGE分析
【基金】：农业部公益性行业计划(编号:200903011-01) 江苏省农业废弃物资源化工程技术研究中心项目(编号:BM2008009)
【分类号】：S216.4
【正文快照】： 沼气发酵是一个复杂的生化过程,主要由多种微生物群落协同完成,因此,微生物群落结构决定着其生态功能。各种提高厌氧发酵产气改进工艺的最终目的就是优化微生物群落结构,充分发挥各种群的生态功能,使有机废物得到高效降解和转化。虽然我国在农村沼气工艺工程方面已经取得了显

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