沼气池宏基因组文库中未培养微生物β-葡萄糖苷酶基因的克隆与鉴定

【摘要】：以间接提取法提取了沼气池样品的微生物宏基因组DNA,用柯斯质粒载体pWEB:TNC构建了一个含三万个克隆的沼气池宏基因组文库,对文库中的克隆随机分析表明,该文库的外源片段平均长度为40 kb,文库的总容量为1 .2×106kb。对其中的一个在七叶苷平板上显色的阳性克隆pGXN100进行进一步亚克隆、测序和序列分析。结果表明,pGXN100上有一个全长为1 863bp的ORF,编码621个氨基酸组成的蛋白质。将该基因命名为Unglu100。与产气克雷伯菌属的一个β-葡萄糖苷酶基因AN292在核苷酸和氨基酸水平上分别有76%和85%的同源性,利用SMART软件进行预测表明,Unglu100可能是PTS中β-葡萄糖苷酶特异性的转运蛋白组件。 【作者单位】： 广西大学生命科学与技术学院;广西壮族自治区科学技术厅;广西亚热带生物资源保护利用重点实验室;微生物及植物遗传工程教育部重点实验室;
【关键词】： 沼气池 宏基因组文库 β-葡萄糖苷酶
【基金】：广西科技攻关项目(桂科攻033002-5)~~
【分类号】：Q93;Q78
【正文快照】： 纤维素是由D-葡萄糖以β-1 ,4糖苷键连接而成的直链状大分子,是自然界中分布最广、含量最为丰富的碳水化合物,也是地球上最大量的可再生性天然资源,但纤维素复杂的内部结构却造成绝大部分难以被分解利用。纤维素酶(cellulase)是一类能协同作用将纤维素降解生成葡萄糖的一组酶

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